1、標準菌種是不可以從冰箱中取出直接使用的，需在實驗前進行活化；

　　2、從標準菌株到實驗使用的菌懸液的傳代次數應不得超過5代，以防止過度的傳代增加菌種變異的風險。在2015版藥典“9203藥品微生物實驗室質量管理指導原則”中明確指出：任何形式的轉種均被認為是傳代1次。

　　3、標準菌株復蘇后的一代，一般是不保存的，因為菌種剛剛從凍干粉的狀態(tài)復蘇，活性還未恢復到不錯的狀態(tài)，再復壯而得的二代菌種，也就是標準儲備菌株，需進行純度和特性的確認，這個確認記錄可證明在操作過程中，菌株未污染雜菌且活性與標準菌株一致。

　　4、保藏時應選擇適宜的菌種保存方法，并注意標示必須清晰明確。由于在試驗過程中，實驗菌種的活性和特性依賴于合適的試驗操作和貯藏條件，大家也越來越重視實驗菌種的狀態(tài)，如果保藏方法及管理不善，菌種優(yōu)良特性便會退化、喪失，甚至導致死亡，就會影響實驗結果。

　　標準菌種的保存使用

　　1、新引進的菌種經形態(tài)、染色、培養(yǎng)性狀、生化特性等的鑒別確定后作記錄，并進行保存。

　　2、長期保存的儲存菌株以冷凍干燥保藏為主，特殊要求的菌種可用其它方法進行保存，保存期可長達幾年至幾十年。

　　3、半儲存菌株以含20%甘油的肉湯或液體石臘封存的半固體瓊脂為主，在0℃以下保存，保存期為3－6個月。

　　4、應用菌株以瓊脂斜面為主，在4℃保存，保存期為1－3個月。

　　5、菌種的傳代不可超過6次。視菌種的特性及使用情況，一般儲存菌株每5年傳記代一次，每1-2年從儲存菌株轉接至半儲存菌株，半儲存菌株每3-6個月傳代一次，每1-3個月從半儲存菌株轉接接至應用菌株。

　　6、每次檢驗用的菌株必須是從應用菌株轉接的新鮮菌株。每支應用菌株用兩次后必須銷毀（121℃，0.1MPa高壓滅菌處理15分鐘以上）。

　　7、各級保存的菌株應有明確的編號、名稱、傳代數、日期等到標識。

　　8、菌種的收發(fā)、保存、使用、傳代等應及時認真詳細地登記，以備查核。

　　9、在保存過程中，如發(fā)生污染退化等問題，應及時報告，以便處理。

　　倍增時間不是代數，倍增時間是菌株特性，不同菌株起菌快慢不一樣，具體工藝需要結合倍增時間、培養(yǎng)基及生長曲線等進行設計

　　對數生長期細胞的生長速率快速拉升，期間微生物的比生長速率大，且菌體生長不受基質濃度限制，繁殖速率極快，細胞數量或質量等生物量一般呈指數增長，根據比生長速率定義有：

　　μ=dCX/dt?1/CX

　　積分變形可得：

　　lnCX1=lnCX0+μ?t

　　繼續(xù)變形：

　　μ?t=（lnCX1－lnCX0）

　　則倍增時間td：

　　=lnCX1－lnCX0/μmax

　　=ln（2/1）/μmax

　　=0.693/μmax

　　其中：

　　μ：比生長速率

　　CX0：起始菌體濃度（g/L）

　　CXt：經過一段時間t后的菌體濃度（g/L）

　　CX：菌體濃度泛指（g/L）

　　td：菌體濃度增大一倍時所需要的時間min