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標準培養(yǎng)基操作中,主要分為以下幾步順序不要搞錯了

更新時間:2020-12-10瀏覽:1174次
  標準培養(yǎng)基的步驟:
 ?。ㄒ唬蚀_稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
 ?。ǘ┬U齪H值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
  (三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
 ?。ㄋ模┓盅b:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
 ?。ㄎ澹缇号囵B(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
  標準培養(yǎng)基的營養(yǎng)協(xié)調(diào)
  微生物細胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù)。
  微生物細胞內(nèi)各種成分間有一較穩(wěn)定的比例。
  在大多數(shù)化能異養(yǎng)菌的培養(yǎng)基中,各營養(yǎng)要素間在量上的比例大體符合以下十倍序列的遞減規(guī)律:
  要素:H2O>C源+能源>N源>P、S>K、Mg>生長因子
  含量:(~10-1)(~10-2)(~10-3)(~10-4)(~10-5)(~10-6)
  A.選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),實驗室的常用培養(yǎng)基:
  細菌:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基);
  放線菌:高氏1號合成培養(yǎng)基培養(yǎng);
  酵母菌:麥芽汁培養(yǎng)基;
  霉菌:查氏合成培養(yǎng)基;
  實驗室一般培養(yǎng):普通常用培養(yǎng)基;
  遺傳研究:成分清楚的合成培養(yǎng)基;
  生理、代謝研究:選用相應(yīng)的培養(yǎng)基配方;
  B.營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適
  營養(yǎng)物質(zhì)的濃度適宜,營養(yǎng)物質(zhì)之間的配比適宜;
  高濃度糖類物質(zhì)、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑制或殺菌作用。
  培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。
  真菌需C/N比較高的培養(yǎng)基;(素食)
  細菌(動物病原菌)需C/N比較低的培養(yǎng)基;(葷食)
  
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