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標(biāo)準(zhǔn)菌種臨時(shí)存放及活化的詳細(xì)步驟

更新時(shí)間:2021-01-15瀏覽:1744次
  A.低溫保存管之臨時(shí)存放及解凍中之一般標(biāo)準(zhǔn)菌種臨時(shí)存放及活化
  步驟一:低溫保存管應(yīng)存放于-20~-80之低溫條件下.
  步驟二:準(zhǔn)備37之70﹪(V/V)酒精浴槽(只能在電氣水浴槽中改放酒精,不可以火加溫,以免危險(xiǎn);若以37水浴取代,應(yīng)避免水中微生物污染),其中事先安放小試管架(可放置低溫保存管之大小),液面不可高達(dá)管塞.
  步驟三:將低溫保存管從低溫保存條件中取出,置于37浴槽之小試管架上.
  步驟四:不斷輕微搖動(dòng)低溫保存管,液面不可高至管塞,直至結(jié)冰*溶解(約需2分鐘).
  日水平板培養(yǎng)基圖片
  B.菌株活化:在無菌操作下
  步驟一:用無菌微量吸管,從已溶解之低溫保存管吸取1-2滴之菌液,滴入固態(tài)培養(yǎng)基(培養(yǎng)基編號及溫度示于菌株訂購單)某一邊緣附近,以劃線法接種于培養(yǎng)基.
  步驟二:將接種好的培養(yǎng)基置于溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng).
  C.劃線法
  步驟一:手持金屬接種環(huán),用酒精燈將接種環(huán)(共約5公分)燒至火紅,并不斷來回?zé)窘饘俟潭U之前約10公分,等待約10秒鐘,將接種環(huán)前端輕觸培養(yǎng)基邊緣凝膠(無菌體部份),待接種環(huán)*冷卻后,以環(huán)沾黏菌滴,由培養(yǎng)基邊緣向中央輕輕橫劃緊接的并行線,直到涵蓋1/3培養(yǎng)基為止(I區(qū)).
  步驟二:灼燒接種環(huán),待數(shù)秒冷卻后,旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基自I區(qū)涂布的邊緣再橫劃數(shù)條線到未接種的區(qū)域(II區(qū)).
  步驟三:重復(fù)2的動(dòng)作完成III區(qū)與IV區(qū).
  步驟四:灼燒接種環(huán),將接種環(huán)歸位.
  標(biāo)準(zhǔn)菌種使用注意事項(xiàng)
  1、菌種活化前,將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中,長時(shí)間室溫下放置會導(dǎo)致菌種衰退;
  2、冷凍管開封、凍干粉復(fù)溶、菌株恢復(fù)培養(yǎng)等操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行;
  3、一些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長;
  4、苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,敬請正確選擇,不清楚時(shí)來電詢問;
  5、某些厭氧菌的培養(yǎng),自開封到接種完成,均需以無氧氣體充填,以保持厭氧狀態(tài);培養(yǎng)過程中亦要保
  持厭氧狀態(tài);
  6、某些菌種,如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促進(jìn)生長;
  7、如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動(dòng)、復(fù)溶液渾濁等異常情況,應(yīng)停止使用對應(yīng)產(chǎn)品。
  8、部分菌種有致病性、擴(kuò)散性,請專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護(hù)性操作。
  
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